ABSTRACT
Los aminoácidos excitatorios (AAEs), L-glutamato y aspartato, son considerados las principales sustancias endógenas neuroactivas involucradas en la transmisión excitatoria. El receptorN-metíl-D-aspartato (NMDAR) es uno de los principales receptores de los AAEs. Este receptor estimula la secreción de la hormona luteinizante (LH) al facilitar la secreción de la hormona liberadora de las gonadotrofinas (GnRH). En este estudio se plantearon dos objetivos: Estandarizar la técnica de Western blot para identificar la subunidad-1 del NMDAR (NMDAR-1) en hipotálamo del ovino; y determinar si existe diferencia en la distribución de la NMDAR-1 en los diferentes cuadrantes hipotalámicos (cuadrantes dorsal-rostral, ventral-rostral, dorsal-caudal, y ventral-caudal) del ovino. Se utilizaron 100 µg de proteína total para identificar la NMDAR-1 en el hipotálamo ovino. Se evidenció un efecto del cuadrante o porción del hipotálamo ovino sobre la expresión proteica de la NMDAR-1. En particular, el cuadrante dorsal-rostral (31,5567 densidad óptica ± 13,0831;P<0,05) expresó más cantidad del receptor que el cuadrante ventral caudal (17,1517 densidad óptica ± 13,0831; P<0,05) y que el cuadrante ventral-rostral (16,4683 densidad óptica ±13,0831; P<0,05). Estos resultados demuestran que el receptor NMDA se expresa más en la región rostral del hipotálamo del ovino, área en la cual se encuentran distribuidos los cuerpos celulares y axones de las neuronas productoras de GnRH. Estos resultados sugieren la participación de la vía glutamatérgica en la regulación de la reproducción de los ovinos.
The excitatory amino acids (EAAs), L-glutamate and aspartate, are considered the major endogenous neuroactive substances involved in excitatory neurotransmission. The N-methyl-D-aspartate receptor (NMDAR) is one of the main excitatory amino acid receptors. Exogenous activation of the NMDAR results in the release of gonadotrophin-releasing hormone (GnRH) from the hypothalamus and subsequent release of luteinizing hormone (LH) from the anterior pituitary. The present study had two aims: to standardize the optimal amount of total protein required to identify the NMDAR subtype-1 (NMDAR-1) in the hypothalamus of the sheep; to determine whether a difference exists in the distribution of NMDAR-1 in different hypothalamic regions (dorsal-rostral, ventral-rostral, dorsal-caudal, and ventral-caudal quadrant) in male sheep. The optimal amount of total hypothalamic protein required to visualize the NMDAR-1 was 100 µg. There was an effect of quadrant on the expression of NMDAR-1 in the hypothalamus of the intact male sheep. In particular, dorsal-rostral quadrant (31.5567 optical density ± 13.0831) expressed more receptor than ventral-caudal quadrant (17.1517 optical density ± 13.0831; P<0.05) and ventral-rostral quadrant (16.4683 optical density ± 13.0831; P<0.05). These data suggest that NMDAR is more expressed in the rostral area of the hypothalamus, where the cell bodies and axons of the GnRH neurons are localized. Thus, these data allow suggest that glutamatergic pathway potentially is involved in modulating the reproductive activity in the ovine.
Subject(s)
Animals , Excitatory Amino Acids , Hypothalamus , Sheep , Blotting, Western/methods , Blotting, Western/veterinary , Veterinary MedicineABSTRACT
Mediante técnicas radiográficas, disección simple y clarificación de tejidos, se estudió la vascularización de los órganos genitales internos del pécari de collar (Tayassu tajacu) en un total de trece (13) hembras pospúberes, cuyas edades estaban comprendidas entre 1 y 2 años de edad. Este estudio demostró que las estructuras que conforman el tracto reproductivo están irrigadas principalmente por las arterias ovárica, uterina, vaginal y vestibular, siendo este patrón arterial constante en todos los ejemplares estudiados. Se observó la presencia de ramas de la arteria ovárica, las cuales cursan en el espesor de la pared de la vena ovárica, interconectando la rama ovárica y uterina de la arteria ovárica a nivel del pedículo vascular útero-ovárico; así mismo se observó que el ovario es irrigado principalmente por la rama ovárica de la arteria ovárica; presentándose una anastomosis entre la rama uterina de la arteria ovárica y la rama craneal de la arteria uterina que irriga la extremidad craneal del cuerno uterino. Además, se evidenciaron anastomosis ipsi y contralaterales entre la arteria uterina, la arteria vaginal y la arteria vestibular que irrigan el cuerpo, cérvix, vagina y vestibulo vaginal. El aporte sanguíneo principalde la tuba uterina estuvo dado por la rama uterina de la arteria ovárica, diferenciándose de la cerda doméstica cuya tuba uterina está irrigada por la rama ovárica de la arteria ovárica. De los resultados de este trabajo se concluye que el patrón vascular del aparato genital femenino del pécari de collar, presenta gran similitud con el reportado para la cerda doméstica (Sus scrofa domesticus).
Subject(s)
Animals , Female , Arteriovenous Anastomosis , Blood Circulation , Genitalia, Female , Ovary , Uterus , Venezuela , Veterinary MedicineABSTRACT
El receptor N-metil-D-aspartato (NMDAR), uno de los principales receptores de los aminoácidos excitatorios, ha sido involucrado en el control de la secreción de la hormona luteinizante (LH) al facilitar la liberación de la hormona liberadora de la hormona luteinizante (LHRH). La capacidad del NMDAR para estimular la liberación de la LHRH está significativamente comprometida en animales castrados. En este estudio se plantearon tres objetivos: Primero, estandarizar las condiciones óptimas para re-amplificar el ADN de la subunidad-1 del NMDAR (NMDAR-1) en ovino. Segundo, determinar si existe diferencia en la distribución del ADN de la NMDAR-1 en los diferentes cuadrantes hipotalámicos del ovino no castrado y finalmente, determinar si las hormonas sexuales testiculares están involucradas en la expresión del NMDAR en el hipotálamo. El ADN de la NMDAR-1 procedente de cuatro cuadrantes del hipotálamo (cuadrantes dorsal-rostral, ventral-rostral, dorsal-caudal, y ventral-caudal) fue amplificado mediante la técnica de RT-PCR. Las condiciones óptimas encontradas para amplificar el ADN de la NMDAR-1 fueron 1,5 mM CIMg2, 100 nM de los oligonucleótidos iniciadores y 59°C como temperatura de hibridación. No se observó efecto del cuadrante del hipotálamo sobre la expresión del ADN de la NMDAR-1 en el hipotálamo del ovino no castrado. La castración redujo (P < 0,05) la expresión del ADN para el NMDAR-1, comparado con la de animales no castrados. Estos resultados sugieren que el NMDAR-1 se encuentra distribuido ampliamente en el hipotálamo del ovino. Además, a través de estos resultados se puede presumir que la expresión del receptor NMDA en el hipotálamo del ovino está afectada por las hormonas sexuales esteroideas.
The N-methyl-D-aspartate receptor (NMDAR), one of the excitatory amino acid receptors, has been implicated in the control of luteinizing hormone (LH) secretion through facilitation of luteinizing hormone releasing-hormone (LHRH). Interestingly, the ability of NMDAR to stimulate LHRH release is significantly compromised in castrated animals. The present study had three aims. Firstly, to standardize the optimal conditions used to amplify the DNA for NMDAR subtype-1 (NMDAR-1) in the sheep. Second, to determine whether a difference exists in the distribution of DNA for NMDAR-1 in different hypothalamic regions in intact male sheep. Finally, to determine if testicular steroid hormones are involved in NMDA receptor expression in the hypothalamus. The DNA of NMDAR-1 was amplified by RT-PCR in four quadrants of the hypothalamus (dorsal-rostral, ventral-rostral, dorsal-caudal, and ventral-caudal quadrant) of intact and castrated male sheep. The optimal conditions to amplify the DNA of NMDAR-1 were 1.5 mM MgCl2, 100 nM of primers and 59°C annealing temperature. In experiment 1, there was no effect of quadrant on the DNA expression of NMDAR-1 in the hypothalamus of the intact male sheep. Experiment 2 revealed that castration reduced (P < 0.05) the expression of DNA for NMDAR compared to that in intact males. Taken together, these data suggest that NMDAR-1 is widely expressed in the hypothalamus of male sheep. Furthermore these experiments suggest that testicular steroid hormones are involved in the regulation of NMDAR-1 expression at the DNA level, which allows understanding of its involvement in the modulation of different activities including reproduction.
ABSTRACT
El objetivo de esta investigación fue describir el patrón vascular arterial del útero y los ovarios del Capibara (Hydrochoerus hydrochaeris). Para llevar a cabo este estudio se emplearon las técnicas de disección simple, clarificación de tejidos y microscopia óptica. Se evaluó un total de quince (15) hembras postpúberes de diferentes edades (6 meses a 2 años de edad). Este estudio demostró que la disposición anatómica de los cuernos, cuerpo y cuello del útero presenta características similares a las descritas en algunas especies de animales domósticos como la perra y la gata, y algunos roedores como la rata y el hamster. El tracto reproductivo está irrigado principalmente por la arteria ovárica, uterina y vaginal, las cuales establecen anastomosis ipsilaterales entre ellas y contralaterales entre las arterias uterinas y vaginales. Se evidenció que la arteria uterina representa la principal fuente de sangre arterial del ovario, enviando ramas segmentales hacia el cuerno y el cuerpo uterino, dividiéndose en su terminación en dos ramas que profundizan las paredes de ambas estructuras, anastomosándose con sus congéneres del lado opuesto. Se requiere más investigación en esta área para complementar la descripción de la irrigación arterio-venosa, lo cual permitiría un mejor entendimiento de la Fisiología reproductiva y el comportamiento sexual en esta especie.